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植物病虫害 时间:2019-11-29 14:52:59 作者:莫敖坤
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发布人:漯河市风帆医学科技开发有限公司 发布时间:2019-11-28 17:22:36

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  病原微生物中常见检测方法有哪些【组织切片】冷冻组织切片的制作

【组织切片】冷冻组织切片的制作 实验步骤 1. 将未受损伤的组织切剖成小样本,约lcmXIcmX0.4cm。 2. 将标本放在卡片的一端。标记该卡片,将带有标本的一端浸入液氮中。60s后,取出标本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小刚好比组织块稍大些,转入预冷的(-70℃)带有标记的小瓶中。 3. 切片前,用1%明胶包被洁净的载玻片。加热至50℃使明胶溶于水中,冷却,加入0.02%叠氮钠。将玻片浸入明胶溶液中30s,取出,自然干燥。 4. 按照仪器使用说明书,用低温恒温器制备冷冻切片。通常切片厚度在5-10gm之间。用包被过的载玻片收集切片。相关阅读推荐:在保存生物标本时我应该注意什么 5. 让切片自然干燥。浸入新鲜配制的4%多聚甲醛中2min。四肢通常是由皮肤和短发造成的
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6. 用PBS洗数次,放入含1%NP-40的PBS中5rain。用PBS洗数次。 7. 将带有组织切片的载玻片放在湿盒中。加合适稀释度的一抗,用含蛋白质的溶液如3%BSA/PBS稀释抗体。 单克隆抗体好选用杂交细胞培养上清(特异性抗体浓度为20-50gg/m1)。小鼠腹水、纯化的单克隆抗体和多克隆抗体,以及粗制的多克隆抗血清应该测试其稀释度,以使特异性抗体的浓度在0.1~10ug/m1之间。如果特异性抗体的浓度是未知的,则制备并测试初始制品的不同稀释度(1:10,1:100,1:1000和1:10 000)。 8. 将玻片置湿盒中于室温下孵育至少60min。对于某些反应来说,孵育时间可延长至24h,以增加其敏感性。不与组织产生共聚合
9. 用PBS洗3次,每次5min以上。 10. 加辣根过氧化物酶标记的二抗(特异性针对一抗)。这些试剂可以购自不同的经销商。如果二抗的确切用量是未知的,测试1:50—1:1000稀释的二抗。用含蛋白质的PBS稀释,如3%BSA/PBS。 11. 将样本置湿盒中,于室温下孵育30min。 12. 用PBS洗3次,每次5min以上。 13. 配制DAB/金属盐试剂。将6mg DAB溶于9ml 0.05mol/L Tris缓冲液(pH7.6)中。加lm[0.3%(W/V)氯化镍贮存液(可用相同浓度的氯化钴代替)。加0.1ml 3%过氧化氢。如果出现沉淀,用Whatman 1#滤纸(或相似品)过滤。 14. 将上述溶液加到标本中。在低倍光学显微镜下观察。当形成足够的棕/黑色沉淀时,用水冲洗以终止反应。通常这一反应过程约需1-20min。 15. 加数滴ris苏木精。以后逐渐增加
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孵育约5min。时间长短取决于染色的强度。 16. 用水轻柔冲洗。 17. 通过各级乙醇使标本依次脱水。在75%乙醇中孵育两次,每次3min,95%乙醇中2次,每次3min,乙醇中2次,每次3min。自然干燥。 18. 加一小滴DPX至标本上。小心在其上面放一盖玻片(1#) 避免产生气泡。用纸巾去除多余的液体。DPX很快可以凝固,样品便可观察并照相。直接用亚冲洗液处理切片3次

组织切片公司告诉大家如何制作中标本

目前通用的植物标本制作方法有干制和浸制两大类,接下来,就随中标本厂家一起来了解下。 1. 植物标本的干制 对含水量较少,易于枯燥,枯燥后又不易变形的植物资料可选用真空枯燥、冰冻枯燥、微波枯燥、硅胶枯燥和吸水纸压制等物理办法进行强制性脱水。也能够首先进行必要的化学处理,然后再进行脱水干制。可以改善光镜免疫组化染色强度
  生物标本是经常使用的道具,在生物教学中,让学生更直观地了解植物和动物,大大提高生物教学质量,让学生有知识有了更深刻的认识,不仅是一种教学道具,也可以作为观赏的对象.今天,我们将介绍昆虫生物标本的制作过程.操作如下: 杀.如果你想做一个完整的形式、颜色和形状都栩栩如生的标本,常常需要用刚捕获的新鲜的虫子,让它死在短时间内迅速、有效的毒性,电力中断在农、毒瓶和管可采用广口瓶到瓶的尺寸可根据对虫体的大小,适当使用软木,软木用不易腐蚀的橡胶塞.把一些木屑放在瓶子的底部,然后把液体倒进液体,使它达到饱和的程度.液体不会泄漏出来,并用长纸或软木覆盖.在一张纸或木头上可以找到一些气孔,这样气体就可以通过. 内脏切除.在制作标本之前,必须去掉昆虫的内脏,这样针插入后就可以迅速干燥.但像蜻蜓蜻蜓昆虫没有去除内脏. 临时存储.昆虫被气体杀死后,应该尽快从瓶子中取出.取出内脏后,放在预先准备好的棉纸袋内,以免昆虫在搬运时变形或变形. 和软.干燥后,虫壳通常是脆的.如果你不采取措施使它软化,很可能它会碎成小片,所以在插入针之前它必须是软的. 进针.用于固定昆虫标本的昆虫针是由不锈钢制成,由细到粗制成.它有七个等级,包括00, 0个、1, 2, 3个、4个和5个. 整体外观.昆虫针完成后,还必须按照正确的位置,在这种昆虫针后局部调整,如翅膀的位置,昆虫脚弯曲和延伸方向的天线,如逐项加以调整,和活虫以同样的态度. 和干.当插入针头和整个位置时,下一步是把昆虫放在安全通风的地方一段时间,通常需要1到2周才能完全干燥. 防腐保鲜.后的步骤是添加适量的防防蛀防霉的昆虫标本,然后插入标签.如果标本数量大,标本应放在标本箱中,置于干燥处,光线不亮.
依据处理办法的不同,干标本的制造办法可分为以下3种: ①腊叶标本制造。备齐足量的吸水纸(多用表芯纸替代),纸的标准以 28×42厘米为宜,将纸铺在特制的植物标本夹上,洗净后的标本要放到表芯纸上,用镊子在纸上进行姿势纠正,然后盖上一份表芯纸,纸上再放置标本,标本上再掩盖表芯纸,这样一层层叠起来夹到标本夹里,用绳子将标本夹勒紧或在标本夹上压一重物,以便表芯纸更快地吸干植物体中的水份。其间要及时换纸,开始每天换 1~2 次,然后可隔 2~3 天换一次.干透的标本要装贴到台纸上,台纸的巨细一般为26×36厘米,台纸的右下角应贴上标签,终粘贴半通明的护盖纸。 ②原色复膜标本制造。组织切片伴随着显微镜技术和免疫实验等的发展已经得到广泛的认同和应用其中各种组织切片方法的操作步骤和应用范围各不相同
先将绿色的枝叶和花朵别离,对绿叶和不同色彩的花朵选用不同的化学办法处理。绿色枝叶的处理:向浓度为50%的醋酸溶液中,参加醋酸铜制成醋酸铜的饱和溶液,取一份饱和溶液加 4份水稀释,然后将植物资料放到稀释液中加热,使温度保持在75℃~85℃之间。此刻绿色枝叶逐步变黄,要继续加热使其康复成本来的绿色后,当即中止加热,然后将标本从溶液中取出,用清水洗净,放到表芯纸上,置于标本夹中加压,并要留意及时换纸。在高温季节
  近年来,人们对动物标本感兴趣,但与此同时,动物标本也被用来研究发展简史.你懂了吗?植物和动物标本. 人类次捕捉野生动物,它们把兽皮给风吹冷,这是主要目的,它们还隐藏在石头和泥堆里,变成动物形象用于祭祀,这可能是早的动物标本.他们发现,皮肤可以用来遮盖衣服,当他们在比赛前宗教仪式的时候,那么随着时间的推移,保持皮肤技术的改进,对皮肤的需求也越来越大,剥皮系统处理器已成为部落中重要的成员之一. 对pizhang质量要求的提高,对pizhang加工技术越来越精细,并在第十八世纪,几乎每个城镇有一个车间做毛皮.到了十九世纪,猎人们开始用兽皮去家具店加工,在店里,工匠们缝制兽皮,把毯子、棉花等填充物塞进去,使艺术品成为现代标本,从此"填充型"标本演变而来. 即使在今天,如果人们谈论这种类型的填充标本,他们可能会感到有点害怕,但究竟什么是填充标本,为什么人们认为它是可怕的.事实上,填充标本的公司,生产的标本是有可能的是不是,面对的是严峻的,这对标本的制备差.我们目前的大多数标本生产仍处于"填补"阶段. 到第二十世纪,一些标本制作艺术的指导下,标本制作艺术有了一个质的飞跃,他们准确的动物解剖是塑造各种动物的形象死去,可以清晰地画出动物和通道的肌肉轮廓,死去的动物变成一个活生生的艺术;普通人的爱好成为流行的时尚和艺术. 通过动物和植物的标本,我们有一个动物标本的短暂的历史中,我们有一个更好的理解动物标本.
也可将标本夹放入真空枯燥箱中抽真空。 一起可加热到75℃左右。各种花样的处理:赤色花可在2%的酒石酸溶液中浸10~20分钟;紫色花可在2%的铝溶液中浸10~20分钟。浸过的花朵从溶液中取出后要洗净、脱水。脱水办法与枝叶相同。干透的枝叶、花朵要及时装贴到台纸上,并在台纸的右下角贴上标签,终送到护卡机里进行高温复膜。 ③原色立体标本制造。取带有花的植物枝叶装入容器里,用粒度为20~50意图硅胶颗粒将其悉数沉没,约10天左右标本干透,即可从硅胶中取出,当即密封到盛有少数枯燥剂的标本瓶中长期保存,也可将标本封铸到无色通明的人工合成高分子资料中保存,不管哪种保存办法都不能受日光曝晒。非常适于切制石蜡切片
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